目錄**章基因載體概論 1 **節基因工程與基因載體 1 第二節基因載體分類 2 一、按照功能分類 2 二、按照來源分類 4 三、按照是否整合分類 5 四、按照目的分類 6 第三節基因載體結構 6 一、質粒載體結構 6 二、噬菌體載體結構 11三、噬菌粒載體結構 13四、黏粒載體結構 15五、人工染色體載體結構 15六、病毒載體結構 16第四節基因表達系統 17總結與展望 17參考文獻 18第二章原核表達載體 20**節原核表達系統概述 20一、原核表達系統歷史 20二、原核表達系統組成 21三、原核表達系統應用 22第二節原核表達載體結構與功能 23一、原核表達載體分類 23二、原核表達載體結構 24三、常用原核表達載體 31第三節原核表達載體優化 35一、載體骨架結構優化 35二、其他優化策略 37總結與展望 40參考文獻 40第三章酵母表達載體 43**節酵母表達系統概述 43一、酵母表達系統歷史 43二、酵母表達系統組成 44三、酵母表達系統應用 49第二節酵母表達載體結構與功能 52一、酵母表達載體分類 52二、酵母表達載體結構 57三、常用酵母表達載體 65第三節酵母表達載體優化 68一、載體骨架結構優化 68二、其他優化策略 71總結與展望 73參考文獻 73第四章昆蟲表達載體 79**節昆蟲表達系統概述 79一、昆蟲表達系統歷史 79二、昆蟲表達系統組成 80三、昆蟲表達系統應用 83第二節昆蟲表達載體結構與功能 87一、昆蟲表達載體分類 87二、昆蟲表達載體結構 91三、常用昆蟲表達載體 92第三節昆蟲表達載體優化 94一、載體骨架結構優化 94二、其他優化策略 106 總結與展望 107參考文獻 107 第五章哺乳動物表達載體 111**節哺乳動物表達系統概述 111一、哺乳動物表達系統歷史 111二、哺乳動物表達系統組成 113三、哺乳動物表達系統應用 117第二節哺乳動物表達載體結構與功能 118一、哺乳動物表達載體分類 118二、哺乳動物表達載體結構 119三、常用哺乳動物表達載體 124 第三節哺乳動物質粒載體優化 131 一、載體骨架結構優化 131 二、其他優化策略 142 總結與展望 149 參考文獻 150 第六章病毒表達載體 154 **節基因治療表達系統概述 154 一、基因治療歷史 154 二、基因治療表達系統組成 155 第二節腺病毒表達載體結構與應用 157 一、腺病毒表達載體結構 157 二、腺病毒表達載體優化 160 三、腺病毒表達載體應用 161 第三節腺相關病毒表達載體結構與應用 162 一、腺相關病毒表達載體結構 163 二、腺相關病毒表達載體優化 164 三、腺相關病毒表達載體應用 165 第四節逆轉錄病毒表達載體結構與應用 166 一、逆轉錄病毒表達載體結構 167 二、逆轉錄病毒表達載體優化 168 三、逆轉錄病毒表達載體應用 169第五節慢病毒表達載體結構與應用 170 一、慢病毒表達載體結構 170 二、慢病毒表達載體優化 172 三、慢病毒表達載體應用 172 總結與展望 173 參考文獻 174 第七章植物表達載體 177 **節植物表達系統概述 177 一、植物表達系統歷史 177 二、植物表達系統組成 179 三、植物表達系統應用 180 第二節植物表達載體結構與功能 183 一、植物表達載體分類 183 二、植物表達載體結構 187 三、常用植物表達載體 196 第三節植物表達載體的優化 201 一、載體骨架結構優化 201 二、其他優化策略 212 總結與展望 215 參考文獻 215 第八章人工染色體載體 220 **節人工染色體載體概述 220 一、人工染色體載體歷史 220 二、人工染色體載體應用 221 第二節人工染色體載體結構與功能 226 一、人工染色體載體分類 226 二、人工染色體載體結構 226 三、常用人工染色體載體 232 第三節人工染色體載體優化 237 一、載體骨架結構優化 237 二、其他優化策略 238 總結與展望 239參考文獻 239 第九章基因編輯載體 242 **節基因編輯系統概述 242 一、基因編輯系統歷史 242 二、基因編輯系統組成 244 三、基因編輯系統應用 246 第二節 CRISPR/Cas9基因編輯系統結構與功能 250 一、CRISPR/Cas9基因編輯系統分類 251 二、CRISPR/Cas9基因編輯系統結構 251 三、常用 CRISPR/Cas9基因編輯載體 255 第三節 CRISPR/Cas9基因編輯系統優化 256 一、合理設計 sgRNA分子 257 二、設計 Cas9突變體及其類似物 259 三、調節 sgRNA-Cas9復合物濃度 263 四、選擇合適遞送系統 264 五、調控細胞修復通路 266 總結與展望 267 參考文獻 267 第十章基因表達載體操作實例 271 **節原核表達載體操作實例 271 一、材料 271 二、方法 272 三、注意事項 280 第二節昆蟲表達載體操作實例 280 一、材料 280 二、方法 281 三、注意事項 284 第三節植物表達載體操作實例 285 一、材料 285 二、方法 285 三、注意事項 288第四節哺乳動物表達載體操作實例 288 一、材料 288 二、方法 289 三、注意事項 291 第五節 CRISPR/Cas9基因編輯操作實例 292 一、材料 292 二、方法 293 三、注意事項 298 總結與展望 298 參考文獻 299 中英文對照表 300